全反式维甲酸调控BMP9诱导3T3-L1前脂肪细胞成骨和成脂分化

作者：刘洋; 李锐冬; 聂茂; 梁凯路

来源：第三军医大学学报, 2016, 38(15): 1722-1728.

DOI：10.16016/j.1000-5404.201511008

• 骨形态发生蛋白9
• 全反式维甲酸
• BMPR-Smad信号
• 前脂肪细胞
• 细胞分化

目的研究全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)调控骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic protein 9,BMP9)诱导前脂肪细胞成骨和成脂分化的作用及相关机制。方法首先用RTPCR检测维甲酸受体在3T3-L1前脂肪细胞中的表达;用BMP9编码序列的重组腺病毒感染3T3-L1细胞,再以1μmol/L的ATRA干预不同时间后,利用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性测定和染色、Western blot检测骨桥素(osteopontin,OPN)、骨钙素(osteocalcin,OC)和脂肪酸结合蛋白(adipocyte fatty acid binding protein,a P2)表达,茜素红染色检测钙盐沉积水平,油红O染色检测脂质积聚研究BMP9和ATRA对前脂肪细胞成骨和成脂分化的作用;利用荧光素酶报告质粒和Western blot检测ATRA对BMP9介导的BMPR-Smad信号通路活性的影响。结果前脂肪细胞中,除视黄醇受体γ外其余5种维甲酸受体均有表达;BMP9能增加前脂肪细胞ALP活性(P<0.01),并促进OPN及OC蛋白表达和钙盐沉积,ATRA能进一步增强该作用(P<0.01);BMP9能促进前脂肪细胞中脂质积聚,并诱导a P2表达,但该作用被ATRA抑制;ATRA还能够上调细胞中BMP9的mRNA和蛋白表达,BMP9合并ATRA组的Samd1/5/8磷酸化水平明显强于BMP9组,BMPR-Smad报告质粒荧光素酶活性也呈相同变化趋势(P<0.01)。结论在前脂肪细胞中,ATRA能增强BMP9的成骨诱导活性,并抑制其诱导的成脂分化;ATRA的作用可能与进一步激活BMP9介导的BMPR-Smad信号有关。

• 单位
  重庆医科大学附属第二医院