五味消毒饮对脂多糖诱导大鼠肾系膜细胞NF-κB信号通路的影响

作者：张禹; 王广伟; 王新爱; 王思瑜; 季兰阁; 郭登洲^*

来源：中国实验方剂学杂志, 2022, 28(09): 16-22.

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20220938

• 五味消毒饮
• 核转录因子-κB(NF-κB)
• 大鼠肾系膜细胞(HBZY-1)
• 炎症反应

目的：观察五味消毒饮对脂多糖(LPS)诱导的大鼠肾系膜细胞(HBZY-1)核转录因子-κB(NF-κB)信号通路的影响，并探讨其作用机制。方法：将大鼠肾系膜细胞随机分为正常组、模型组、贝那普利组(50μmol·L-1)、五味消毒饮高、低剂量组(2.75、0.69 g·kg-1)。正常组、模型组、贝那普利组使用10%正常大鼠血清，五味消毒饮高、低剂量组使用10%含药血清。除正常组外，其余4组给予LPS(100μg·L-1)以体外干预。倒置显微镜观察细胞形态的变化；免疫荧光法(IF)检测NF-κB p65的表达；噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活力；酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测细胞中白细胞介素-1β(IL-1β)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、层粘连蛋白(LN)和纤连蛋白(FN)的含量；实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测细胞中IL-1β、FN、NF-κB p65 mRNA的表达；蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞中磷酸化NF-κB抑制蛋白激酶β(p-IKKβ)、磷酸化NF-κB抑制蛋白α(p-IκBα)、NF-κB p65蛋白的表达。结果：与正常组比较，模型组细胞增殖显著增多(P<0.01)，细胞上清中IL-1β、ICAM-1、LN、FN的含量显著增多(P<0.01),IL-1β、FN、NF-κB p65 mRNA表达显著升高(P<0.01),p-IKKβ、p-IκBα、NF-κB p65蛋白表达显著升高(P<0.01)。与模型组比较，各给药组细胞增殖明显降低(P<0.05,P<0.01)，细胞上清中IL-1β、ICAM-1、LN、FN的含量明显减少(P<0.05,P<0.01),IL-1β、FN、NF-κB p65 mRNA的表达明显降低(P<0.05,P<0.01),p-IKKβ、p-IκBα、NF-κB p65蛋白的表达显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论：五味消毒饮可减轻由LPS诱导的肾系膜细胞损伤，其作用机制可能与抑制NF-κB信号通路的启动有关。

• 单位
  河北中医学院; 河北省中医院