西藏巨柏双向电泳叶片总蛋白提取方法优化

作者:尹泽超; 王玉婷; 王耀杰; 桑利群; 罗秋香; 孟凡娟*
来源:中南林业科技大学学报, 2019, 39(07): 143-146.
DOI:10.14067/j.cnki.1673-923x.2019.07.020

摘要

为了获取高质量的西藏巨柏叶片蛋白质,分别采用酚抽提法、TCA/丙酮法和改良的TCA丙酮法3种方法对西藏巨柏叶片进行总蛋白的提取,同时利用蛋白试剂盒(The 2-D Quant Kit)对蛋白质的浓度和纯度进行了分析测定,并通过蛋白质斑点数量及分布特征,最后确定了最佳蛋白提取方法。结果表明:对样品研磨的精细程度、丙酮清洗沉淀次数等操作细节均能影响提取结果,同时采用改良的TCA丙酮法提纯后的结果最佳。说明改良的TCA丙酮法可应用于西藏巨柏叶片后续的蛋白质组学研究。