摘要
目的研究葛根素对氧糖剥夺(OGD)血管性痴呆(VD)高迁移率族蛋白1(HMGB1)、巨噬细胞游走抑制因子(MIF)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及Akt表达的影响。方法选取生长状况良好的PC12细胞传代,实施OGD建立VD细胞模型。按随机数字表法分为对照组、模型组以及低、中、高剂量葛根素组。选择葛根素有效浓度分别为0.1μmol/L、1.0μmol/L、10.0μmol/L以及OGD有效时间2 h、4 h、6 h、12 h完成预实验,MTT结果发现:随着葛根素浓度的增加,PC12细胞存活率升高,随着OGD施加的延长,PC12细胞存活率下降。因此,结合半数有效量选用0.1μmol/L、1.0μmol/L、10.0μmol/L葛根素作为低、中、高剂量干预浓度,并以6 h作为OGD时间完成后续实验。采用MTT法进行细胞存活率测定,以免疫蛋白印迹法(Western Blot)检测HMGB1、MIF、TNF-α蛋白及Akt蛋白表达水平,并进行相关性分析。结果与对照组比较,模型组及低、中、高剂量葛根素组HMGB1、MIF、TNF-α蛋白表达水平均升高(P<0.05),Akt蛋白表达水降低(P<0.05);与模型组比较,低、中、高剂量葛根素组HMGB1、MIF、TNF-α蛋白表达水平均降低(P<0.05),Akt表达水平升高(P<0.05);高剂量葛根素组HMGB1、MIF、TNF-α蛋白表达水平低于低、中剂量葛根素组(P<0.05),Akt表达水平高于低、中剂量葛根素组(P<0.05);中剂量葛根素HMGB1、MIF、TNF-α蛋白水平低于低剂量葛根素组(P<0.05),Akt水平高于低剂量葛根素组(P<0.05)。经Pearson相关性分析得出:HMGB1、MIF、TNF-α蛋白两两之间均呈正相关(P<0.01),且HMGB1、MIF、TNF-α蛋白与Akt呈负相关(P<0.05或P<0.01)。结论葛根素对OGD VD的作用机制可能与Akt蛋白表达上调及HMGB1、MIF、TNF-α蛋白表达抑制有关。
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单位深圳市盐田区人民医院