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摘要
旨在提高新发现的牛丙型肝炎病毒毒株——广东湛江毒株(bovine hepacivirus-GDZJ,BovHepV-GDZJ)的检测及诊断能力，初步了解广东地区蜱携带BovHepV-GDZJ的情况，本研究结合宏转录组学、高通量测序及PCR技术，针对高通量测序结果中丰度高的基因区域，设计该病毒的巢式PCR特异性引物。通过优化巢式PCR方法的最佳退火温度，建立检测BovHepV-GDZJ的特异性巢式PCR检测方法。结果显示：本方法对该病毒标准质粒最低检测值为6.8 copies·μL-1;对沙粒病毒等蜱携带的常见病原均无反应；应用此方法对115份广东湛江的蜱样品进行了检测，测序结果显示，该批蜱携带BovHepV阳性率为46.08%(53/115)。本研究首次在蜱中检测到BovHepV,揭示了BovHepV可能的传播途径，并建立了一套针对BovHepV-GDZJ株的特异性巢式PCR检测方法，为广东地区检测和预防BovHepV提供技术帮助，也为控制BovHepV的流行提供参考。
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