摘要
目的观察马来酸噻吗洛尔对体外培养的血管瘤内皮细胞(HemEC)增殖及凋亡的影响。方法收集来源于郑州大学第二附属医院2019年6月6例患儿手术切除并经病理证实为血管瘤组织标本, 其中女4例, 男2例, 年龄范围为1.5~6.0个月, 体重3.2~7.4 kg。分离并培养HemEC。实验分为实验组(HemEC组)、空白对照组。通过免疫细胞化学法检测相关抗原因子抗血管性血友病因子(vWF)、CD31在HemEC中的表达。体外以马来酸噻吗洛尔浓度分别为0、30、60、90、120、150 μmol/L, 处理HemEC 24、48、72 h后, 噻唑蓝(MTT)法检测细胞的增殖能力;分别经0、90 μmol/L马来酸噻吗洛尔处理HemEC 24 h后, 采用流式细胞仪检测细胞凋亡率。多样本均数比较采用方差分析, 采用t检验对比组间计量资料。结果免疫组织化学检测显示vWF、CD31标志物表达均为阳性, 证明此细胞确为HemEC。通过MTT法检测马来酸噻吗洛尔浓度(0、30、60、90、120、150 μmol/L)作用于HemEC不同时间(24、48、72 h)后吸光度(A)值可知, 随着浓度的增加, 马来酸噻吗洛尔对HemEC增殖活性的抑制作用呈剂量依赖性逐渐增强(F=22.410、66.382、36.989, P值均<0.05);30、60 μmol/L马来酸噻吗洛尔作用24、48 h, 可引起HemEC轻度抑制(F=6.103、7.010, P值均<0.05);在马来酸噻吗洛尔浓度为90 μmol/L时, 24 h后A值(0.186±0.014)与对照组(0.299±0.046)比较差异有统计学意义(t=4.211, P<0.05), 出现明显的细胞抑制现象, 抑制率为38%。马来酸噻吗洛尔作用于HemEC 72 h时细胞的增殖活性(0.292±0.016)与48 h增殖活性(0.467±0.020)比较, 差异无统计学意义(t=0.068, P>0.05), 所以马来酸噻吗洛尔抑制HemEC增殖, 最适有效低浓度为90 μmol/L, 最适有效作用时间为24 h;流式细胞仪检测实验组细胞凋亡率为(13.47±0.15)%与空白对照组的(3.86±0.46)%比较, 差异有统计学意义(t=4.563, P<0.05), 说明马来酸噻吗洛尔能明显促进HemEC的凋亡。结论马来酸噻吗洛尔抑制HemEC增殖、促进其凋亡。
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单位郑州大学第二附属医院