过氧化物还原酶1在脑出血后的表达变化及作用

作者:杨国强; 黄嘉诚; 袁俊杰; 张钦; 龚昌雄; 谢乐星; 熊小檍; 杨清武*
来源:第三军医大学学报, 2020, 42(03): 300-306.
DOI:10.16016/j.1000-5404.201909060

摘要

目的探讨过氧化物还原酶1(peroxiredoxin 1,Prdx1)在中枢神经系统中的细胞定位,以及脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)后Prdx1的表达变化和可能的作用机制。方法取5只8~10周龄SD大鼠脑组织灌注,冰冻切片,免疫荧光染色比较Prdx1在神经元、星形胶质细胞和小胶质细胞中的表达情况。35只8~10周龄SD大鼠按随机数字表法分为sham组、ICH 12 h组、ICH 1 d组、ICH 2 d组、ICH 3 d组、ICH 4 d组、ICH 5 d组(n=5),后5组采用自体血注射法建立ICH模型,sham组予以等量生理盐水作为对照。取各组大鼠脑组织,Western blot和qRT-PCR检测各组中Prdx1 mRNA和蛋白的表达。在HeLa细胞中转染Prdx1干扰质粒或空质粒载体,分为干扰组和对照组,并对两组HeLa细胞进行转录组测序(RNA sequencing,RNA-seq),对差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)进行GO分析,预测Prdx1在ICH中可能的作用。结果免疫荧光染色结果提示:在皮层,Prdx1主要分布于NeuN+的神经元,而在纹状体中,Prdx1主要分布于GFAP+的星形胶质细胞中。Western blot及qRT-PCR结果提示:Prdx1表达在ICH后3 d显著增高(P<0.05),随着时间延长,逐渐降低。RNA-seq及GO分析提示Prdx1引起的差异表达基因主要涉及在炎症反应、细胞凋亡、固有免疫反应、轴突发育等与ICH继发损伤相关的通路。结论 Prdx1在不同脑区有不同的细胞分布特点;ICH后,Prdx1升高明显,其在ICH中的可能作用机制与炎症、免疫反应、轴突发育等相关。

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