摘要
为了研究胰岛素样生长因子2结合蛋白(IGF2BPs)基因是否参与珍珠贝的生物矿化,本实验鉴定了一个马氏珠母贝IGF2BP1基因,命名为PfIGF2BP1-1,该基因cDNA全长为7 348 bp,ORF长1 818 bp,编码605个氨基酸。多序列比对和系统进化分析表明,PfIGF2BP1-1有2个RRM结构域和4个KH结构域,与其他物种来源的IGF2BPs同源。实时荧光定量PCR结果显示,PfIGF2BP1-1在马氏珠母贝的8个组织中均有表达,在闭壳肌组织中表达量最高,其次为足和外套膜组织。利用pET-32a原核表达载体构建了含有PfIGF2BP1-1成熟多肽区的重组质粒并成功表达蛋白。在IPTG浓度为0.5 mmol/L,37℃培养8 h的条件下诱导表达PfIGF2BP1-1蛋白最佳。PfIGF2BP1-1蛋白刺激马氏珠母贝外套膜原代细胞,引起壳基质蛋白基因Accbp、MSI7、Nacrein的表达水平显著上升,表明PfIGF2BP1-1蛋白可诱导壳矿化相关基因的表达,参与马氏珠母贝的生物矿化过程。
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