OPN对低氧诱导的SD大鼠肺动脉平滑肌细胞自噬及增殖能力的影响

作者：鲍金; 刘川川; 陈辛玲; 刘辉琦; 刘杰; 曹学锋; 王生兰^*

来源：中国高原医学与生物学杂志, 2019, 40(04): 223-231.

DOI：10.13452/j.cnki.jqmc.2019.04.002

• 低氧
• 肺动脉平滑肌细胞
• 骨桥蛋白
• 自噬

目的观察低氧条件下SD大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)骨桥蛋白及自噬相关蛋白Beclin1、LC3B的表达,并探讨OPN过表达及RNA干扰对低氧诱导的肺动脉平滑肌细胞自噬及细胞增殖力的影响。方法细胞分为6组:常氧对照组(Normoxic)、低氧对照组(Hypoxia)、低氧+OPN干扰空病毒组(H+OPN EV)、低氧+OPN干扰慢病毒组(H+OPN shRNA)、低氧+OPN过表达空病毒组(H+OPN OEV)、低氧+OPN过表达慢病毒组(H+OPN shoRNA)。各组分别用5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EdU)阳性标记率法检测细胞增殖能力、流式细胞术分析细胞周期、Western Blot法检测OPN及自噬相关蛋白Beclin1、LC3B的表达。结果经低氧干预后OPN和自噬相关蛋白Beclin1、LC3B表达相较常氧组增高(P<0.05),细胞增殖力增强(P<0.05),促进细胞周期进入S期(P<0.05);与低氧对照组相比,低氧+OPN干扰慢病毒组OPN蛋白表达量降低,Beclin1、LC3B蛋白表达量增高(P<0.05),细胞增殖能力减弱(P<0.05),细胞周期阻滞于G0/G1期(P<0.05)。低氧条件下细胞经OPN过表达处理后,OPN过表达组OPN蛋白表达增高,自噬相关蛋白Beclin1、LC3B表达量降低(P<0.05);细胞增殖能力未进一步增强(P>0.05),细胞周期无变化(P>0.05)。结论低氧条件下PASMCs细胞增殖增强,OPN和自噬相关蛋白Beclin、LC3B表达增强。且OPN可促进低氧条件下PASMCs细胞增殖并负向调控大鼠PASMCs的自噬。

• 单位
  青海大学; 青海大学附属医院