微小RNA-592靶向调控JAK1表达及对非小细胞肺癌细胞侵袭迁移的影响

作者：魏海霞; 宋永娜; 田文娴

来源：临床肿瘤学杂志, 2019, 24(08): 673-677.

• 非小细胞肺癌
• 微小RNA-592
• 迁移侵袭
• Janus激酶1

目的探讨微小RNA-592(miR-592)对Janus激酶1(JAK1)表达的靶向调控作用及非小细胞肺癌(NSCLC)细胞迁移和侵袭的影响。方法采用实时定量PCR(QPCR)检测NSCLC细胞系A549和人正常肺上皮细胞BEAS-2B的miR-592水平。经脂质体Lipofectamine 2000法向A549细胞转染miR-592模拟物(过表达组)和阴性对照(NC组)后采用QPCR检测miR-592水平,划痕实验和Transwell小室实验分别检测划痕愈合率和穿膜细胞数以评价迁移和侵袭能力,双荧光素酶报告基因实验验证miR-592对JAK1的靶向调控作用,Western blotting检测JAK1、磷酸化JAK1(p-JAK1)、磷酸化信号转导和转录激活因子3(p-STAT3)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的蛋白水平。结果 QPCR结果显示A549细胞的miR-592水平为0.312±0.097,低于BEAS-2B细胞的1.062±0.136(P<0.05);过表达组的miR-592相对表达量为6.647±1.847,高于NC组的1.054±0.168(P<0.05)。过表达组的愈合率和穿膜细胞数分别为(27.45±2.51)%和(105.2±15.8)个,均低于NC组的(54.45±3.06)%和(312.4±19.2)个,差异有统计学意义(P<0.05)。A549细胞中miR-592模拟物可抑制JAK1野生型3′非翻译区的相对荧光素酶活性,但对突变型JAK1的无影响。与NC组相比,过表达组的JAK1、p-JAK1、p-STAT3和MMP-9蛋白水平均下调(P<0.05)。结论 miR-592负调控NSCLC细胞侵袭和迁移,可能与抑制JAK/STAT3信号通路活性有关,提示miR-592发挥抑癌作用且可能是NSCLC治疗的潜在靶标。

• 单位
  郑州大学