微RNA-374c-5p通过靶向LIMK1增强人乳腺癌MDA-MB-231/DDP细胞对顺铂的敏感性

作者：乔伊娜; 文思阳; 孙可馨; 阴嘉莉; 万雪颖; 曾欢; 杨丽萍; 柳满然^*

来源：肿瘤, 2020, 40(02): 81-91.

• 乳腺肿瘤
• 微RNAs
• 顺铂
• 抗药性,肿瘤
• miR-374c-5p
• Lim结构域激酶1

目的:探讨人类(Homo sapiens,hsa)-微RNA (micro RNA,miR)-374c-5p对人乳腺癌MDA-MB-231/DDP细胞顺铂敏感性的影响及其作用机制。方法:采用实时荧光定量PCR法检测乳腺癌MCF-10A、MDA-MB-231和MDA-MB-231/DDP细胞中hsa-miR-374c-5p和Lim结构域激酶1 (Lim domain kinase 1,LIMK1)的表达情况。将hsa-miR-374c-5p模拟物(mimics)和抑制剂(inhibitor)以及LIMK1 siRNA和过表达质粒分别转染乳腺癌MDA-MB-231/DDP细胞,采用实时荧光定量PCR法检测hsa-miR-374c-5p和LIMK1 mRNA表达变化,蛋白质印迹法检测LIMK1蛋白表达水平;分别采用CCK-8、FCM和平板克隆形成实验检测细胞增殖、凋亡和克隆形成能力的变化;荧光素酶报告基因实验验证hsa-miR-374c-5p与LIMK1的结合关系。结果:乳腺癌MDA-MB-231/DDP细胞中hsa-miR-374c-5p和LIMK1的表达趋势相反。过表达hsa-miR-374c-5p或敲低LIMK1表达均可抑制MDA-MB-231/DDP细胞的增殖活力(P值均<0.05)和克隆形成能力(P值均<0.05),而细胞凋亡率明显升高(P值均<0.05),对顺铂的敏感性明显增强(P值均<0.05);沉默hsa-miR-374c-5p后,情况相反(P值均<0.05);且在转染了hsa-miR-374c-5p mimics的细胞中过表达LIMK1可以逆转单一过表达hsa-miR-374c-5p引起的细胞表型改变(P值均<0.05)。hsa-miR-374c-5p可靶向调控LIMK1的表达。结论:Hsa-miR-374c-5p可以通过靶向调控LIMK1的表达,增强人乳腺癌MDA-MB-231/DDP细胞对顺铂的敏感性。

• 单位
  重庆医科大学