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摘要
目的：研究酸枣叶缩合单宁的结构特征及其对酪氨酸酶的效应和黑色素生成的调控机制。方法：利用Sephadex LH-20凝胶柱色谱技术分离制备酸枣叶缩合单宁纯化物，采用硫醇降解结合高效液相色谱-电喷雾电离质谱（Thiolysis-HPLC-ESI-MS）解析酸枣叶缩合单宁的结构单元组成，运用酶动力学、紫外光谱、荧光猝灭等方法系统研究酸枣叶缩合单宁对酪氨酸酶的抑制作用机理，应用CCK-8法、多巴氧化法、NaOH裂解法和实时荧光定量PCR检测酸枣叶缩合单宁对小鼠黑色素瘤细胞的增殖、酪氨酸酶活性、黑色素合成及其相关基因表达水平的影响。结果：构成酸枣叶缩合单宁的主要结构单元是（表）儿茶素和（表）棓儿茶素；酸枣叶缩合单宁具有较强的酪氨酸酶单酚酶和二酚酶抑制活性，是二酚酶可逆的混合型抑制剂；酸枣叶缩合单宁可有效抑制小鼠黑色素瘤细胞的增殖、酪氨酸酶活性、黑色素生成量以及酪氨酸酶（TYR）、酪氨酸酶相关蛋白-1（TRP-1）、小眼畸形相关转录因子（MITF）等基因的表达。结论：通过在酶水平和细胞水平的综合分析，阐明酸枣叶缩合单宁对黑色素合成的分子调控机制，为后期酸枣叶缩合单宁开发为新的美白化妆品添加剂和果蔬保鲜剂提供理论依据。
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单位河南城建学院; 生命科学学院; 长江大学
