空肠弯曲菌免疫磁珠富集方法的建立

作者:王壮; 欧瑜; 唐泰山; 祝长青; 栾军; 蒋原; 张常印
来源:药物生物技术, 2014, 21(01): 43-47.
DOI:10.19526/j.cnki.1005-8915.2014.01.009

摘要

为建立空肠弯曲菌富集方法,研究利用空肠弯曲菌特异性多表位人工多肽的特异性抗体包被磁珠,制成免疫磁珠富集空肠弯曲菌。在不同稀释梯度的菌液中加入免疫磁珠,富集目标菌,铺于CFA显色平板培养,统计菌落个数,确定免疫磁珠的敏感性;在非空肠弯曲菌和弯曲菌中分别添加空肠弯曲菌,用免疫磁珠富集,确定免疫磁珠的特异性。结果表明2 mg免疫磁珠可以在1 mL空肠弯曲菌菌液(浓度为2.5×103/mL)中稳定富集到空肠弯曲菌,统计菌落数为100300 CFU,具有较好的敏感性;在干扰菌中富集空肠弯曲菌,铺板培养后,荧光PCR鉴定为阳性,富集不受干扰菌影响。用建立的免疫磁珠富集方法富集采集样品中的空肠弯曲菌,结果显示该方法有较好的特异性,具有较好的应用前景。

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