腺相关病毒与人α_1干扰素基因重组体的构建

作者：林锋; 贾杰; 陈智; 邱平

来源：中国热带医学, 2004, (01): 32-34.

• 腺相关病毒
• 人α1干扰素基因
• 基因重组

目的　构建腺相关病毒载体 (pWP8A)与人α1 干扰素 (hIFNα1 )基因重组体。　方法　用多聚酶链反应 (PCR)方法扩增获得hIFNα1 基因 ;以T A克隆方法将PCR扩增hIFNα1 基因亚克隆到PCR2 1质粒中 ,产生PCR2 1-hIFNα1 ;用EcoRI酶切PCR2 1-hIFNα1 后回收hIFNα1 基因片断 ,将此片断连接到pWP8A的EcoRI位点上 ,构建重组体pWP8A-hIFNα1 ;pWP8A -hIFNα1 转化JM10 9大肠杆菌扩增 ,hIFNα1 基因经测序鉴定符合Genebank中hIFNα1 序列 ,并用BamHI酶和XbalI酶双酶切鉴定hIFNα1 基因插入方向。　结果　经PCR扩增获得 5 67bphIFNα1 基因 ;构建重组体pWP8A -hIFNα1 ,经测序证实pWP8A -hIFNα1 中的hIFNα1 与Genebank中hIFNα1 序列相同 ,用BamHI酶和XbalI酶双酶切鉴定hIFNα1 基因插入方向正确的重组体pWP8A -hIFNα1 。　结论　成功构建腺相关病毒载体 (pWP8A)与人α1 干扰素(hIFNα1 )基因的重组体。

• 单位
  海南省人民医院; 浙江大学