桔梗皂苷-D诱导Hela细胞凋亡的作用及机制研究

作者：马琳琳; 何慧; 张世科; 李威^*

来源：现代中西医结合杂志, 2020, 29(22): 2429-2436.

• 桔梗皂苷-D
• 宫颈癌
• Hela细胞
• 凋亡
• 机制

目的研究桔梗皂苷-D对宫颈癌Hela细胞凋亡的诱导作用及其机制。方法将体外培养的Hela细胞系随机分为4组,对照组常规培养,桔梗皂苷-D低、中、高剂量组(7,14,28μmol/L)分别加入相应浓度桔梗皂苷-D进行培养。各组细胞培养24 h后,收集细胞用于后续检测。采用CCK8法检测细胞活力,采用流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡比率,采用TUNEL染色法观察细胞核的形态变化,采用RT-PCR法检测细胞内Bax、P53、Caspase-3、Bcl-2、Hippo信号通路关键因子(MST、LATS、YAP、TAZ、C-myc、β-Catenin)mRNA表达水平,采用Western blot法检测细胞内Bax、P53、Caspase-3、Bcl-2、Hippo信号通路关键因子蛋白表达水平。结果与对照组比较,各组桔梗皂苷-D细胞活力随桔梗皂苷-D浓度增高而显著下降(P均<0.05)。与对照组比较,桔梗皂苷-D各组G1期细胞比例显著增高(P均<0.05),且G1期细胞占比随桔梗皂苷-D浓度增高而逐渐增高,桔梗皂苷-D中、高剂量组G2期及S期Hela细胞占比显著降低(P均<0.05)。与对照组比较,桔梗皂苷-D各组TUNEL染色阳性细胞核的比率和早期凋亡细胞比例均显著增高(P均<0.05),且随桔梗皂苷-D浓度增高而逐渐增高。与对照组比较,桔梗皂苷-D各组Bax、P53、Caspase-3、Bcl-2的mRNA和蛋白表达水平随桔梗皂苷-D浓度增高而逐渐升高(P均<0.05),YAP、TAZ、C-myc、β-Catenin的mRNA和蛋白表达水平随桔梗皂苷-D浓度增高而逐渐降低(P均<0.05)。结论桔梗皂苷-D能显著抑制Hela细胞增殖,促进其凋亡,其机制可能是通过激活Hippo信号通路,下调该通路下游YAP、TAZ的过度表达,上调促凋亡因子Bax、P53、Caspase-3表达,从而使Hela细胞发生G1期阻滞,促进Hela细胞凋亡。

• 单位
  黑龙江中医药大学