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摘要
目的探讨组织工程化胰腺的体外构建及其在细胞移植中的作用。方法取SD大鼠8只,采用旋转壁式生物反应器,建立微重力环境下共培养SD大鼠胰岛和睾丸支持细胞,建立糖尿病SD大鼠模型,进行胰岛移植。移植后,检测各组大鼠血糖水平,摘取30 d以上保持血糖正常水平的大鼠肾脏组织,清洗后固定,包埋、切片,进行苏木素-伊红(HE)染色,显微下观察,并进行Fas-L、胰岛素免疫组化学法染色,对大鼠移植物进行鉴定并检测葡萄糖糖耐量。结果分离纯化的睾丸支持细胞贴壁后于培养箱中继续培养24 h,细胞基本已全部贴壁生长,细胞立体感较强,显微镜下可见极少量球形精细胞贴附于睾丸细胞上,经台盼蓝染色后活细胞透亮,总数占95%以上。HE染色可见细胞形态呈宽大柱状或纤维样,排列紧密,多个一起存在时融合成片,界限不清,呈单层膜状,一般有34个突起,突起相互连接,胞质铺展较大,可见多量大小不一的空泡状结构。培养24 h后,睾丸支持细胞-胰岛球形细胞复合物逐步形成,复合物呈球形,被支持细胞包裹;Fas-L免疫组织切片染色可见支持细胞呈阳性,与胰岛素阳性的β细胞检测结果与透射电镜观察结果一致,共培养的胰岛生长状态相对较好。从血糖水平结果总结,微重力环境下共培养睾丸支持细胞-胰岛细胞复合物能够提高胰岛活性,降低其免疫原性;与接受新鲜胰岛移植的SD大鼠相比,复合物移植使模型大鼠保持血糖正常时间明显更久。结论移植睾丸支持细胞-胰岛细胞复合物的模型大鼠体内胰岛对葡萄糖保持明显的敏感性,复合物移植组大鼠平均血糖基本在2 h内可以恢复正常,与正常检测结果接近。
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