Ca2+/CaN信号通路在双酚A影响巨噬细胞分泌IL-6中作用

作者：范峥; 何秀; 于海洋; 段晓旭; 张玉敏; 马明月; 段志文; 裴秀丛

来源：中国职业医学, 2019, 46(04): 428-433.

• 双酚A
• 巨噬细胞
• 白细胞介素6
• 钙调神经磷酸酶
• 钙离子

目的探讨Ca2+/CaN信号通路在双酚A影响巨噬细胞分泌白细胞介素6(IL-6)中的作用机制。方法取对数生长期Raw264.7细胞分为对照组、激活剂组、3个双酚A组和抑制剂组。对照组细胞予体积分数为0.10%二甲基亚砜处理;激活剂组细胞予质量浓度为2 mg/L脂多糖处理;3个双酚A组细胞分别予终浓度为1、10、100μmol/L的双酚A处理。另设2个异搏定组和2个他克莫司(FK506)组,分别予终浓度为10、30μmol/L的异搏定或终浓度为250、500 nmol/L的FK506刺激细胞,再予终浓度为100μmol/L的双酚A组处理细胞。分别于培养4、12、24 h时间点收获细胞,采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测4、12 h时间点细胞中IL-6、钙调神经磷酸酶(CaN)的mRNA相对表达水平,采用酶联免疫吸附实验检测24 h时间点细胞IL-6和CaN蛋白相对表达水平,采用单管型多功能检测仪检测4 h时间点细胞内钙离子(Ca2+)水平。结果在12 h时间点,IL-6 mRNA相对表达水平在100μmol/L双酚A组细胞分别高于对照组、激活剂组和1、10μmol/L双酚A组(P<0.05),均高于10、30μmol/L异搏定组和250、500 nmol/L FK506组(P<0.05)。CaN mRNA相对表达水平在100μmol/L双酚A组细胞分别高于对照组、激活剂组和1、10μmol/L双酚A组(P<0.05),并高于10、30μmol/L异搏定组(P<0.05)。100μmol/L双酚A组细胞IL-6蛋白相对表达水平分别高于对照组、激活剂组和1、10μmol/L双酚A组(P<0.05);CaN蛋白相对表达水平在100μmol/L双酚A组和10、30μmol/L异搏定组细胞均高于对照组、激活剂组(P<0.05),在10、30μmol/L异搏定组均低于100μmol/L双酚A组(P<0.05)。细胞内Ca2+水平在100μmol/L双酚A组分别高于对照组和激活剂组(P<0.05),在10μmol/L异搏定组低于100μmol/L双酚A组(P<0.05)。结论双酚A可能通过激活Ca2+/CaN信号通路而促进巨噬细胞分泌IL-6。

• 单位
  沈阳医学院; 公共卫生学院