脯氨酸羟化酶2 siRNA对抗霉素诱导肾小管上皮细胞凋亡的影响

作者：陈威; 许国双; 刘书馨; 孙世仁; 刘宏宝; 王汉民; 刘晓渭; 张鹏

来源：中华肾脏病杂志, 2006, (11): 673-676.

• 缺氧诱导因子
• 脯氨酸羟化酶
• 凋亡
• RNA
• 小分子干扰
• 肾小管上皮细胞

目的探讨是否脯氨酸羟化酶2(PHD2)siRNA通过减少缺氧诱导因子(HIF)1的降解而减轻缺氧引起的肾小管上皮细胞凋亡。方法构建针对人PHD2的表达质粒,将其转染到培养的人肾小管上皮细胞系(HKC)中。用RT-PCR方法观察其对PHD2表达的抑制作用。Western印迹观察HIF-1α的表达。培养的HKC细胞分为对照组、模型组和siRNA组。siRNA组经PHD2 siRNA转染后与模型组同时用抗霉素诱导,用Western印迹方法观察3组细胞HIF-1α的表达,用流式细胞仪观察3组细胞的凋亡情况。结果经PHD2 siRNA转染的HKC细胞PHD2 mRNA表达明显下调(P<0．01),HIF-1α蛋白表达明显上调(P<0．05)。经抗霉素处理后,模型组和siRNA组HIF-1α蛋白表达均明显高于对照组(P<0．01),但siRNA组HIF-1α蛋白表达高于模型组(P<0．05)。与模型组相比,siRNA组细胞凋亡明显减轻(P<0．05)。结论通过RNA干扰技术抑制PHD2的表达可以增强HKC细胞HIF-1的蛋白表达,从而增强其在缺氧条件下的抗凋亡能力。

• 单位
  西京医院; 第四军医大学; 大连市中心医院