人线粒体DNA基因表达谱芯片的制备及鉴定

作者：孙恒文; 胡义德; 曾子君; 潘燚; 方良毅; 谭佩欣; 曾向伟

来源：生物医学工程研究, 2015, 34(03): 164-169.

DOI：10.19529/j.cnki.1672-6278.2015.03.007

• 线粒体DNA
• 基因表达
• 寡核苷酸芯片
• 信使RNA
• 核糖体RNA
• 转运RNA

研制人线粒体DNA(mitochondrial DNA,mt DNA)表达谱芯片,鉴定芯片的特异性和稳定性,完善芯片的制备和使用程序,优化实验参数,为线粒体功能研究提供物质基础及技术保障。以人mt DNA剑桥序列为标准,设计mt DNA编码的13种mRNA、2种rRNA和9种tRNA基因及蛋白产物定位于线粒体的核DNA(n DNA)编码的5种凋亡相关基因寡核苷酸探针。芯片点样仪点制芯片,进行荧光显示和洗脱,用其检测人宫颈癌上皮Hela细胞和人肾小管上皮Hc1细胞c DNA文库mt DNA编码基因及n DNA编码凋亡相关基因的差异表达情况。所点制的芯片扫描结果显示,样点分布均匀、清晰,规整度好,无漏点、连点。c DNA文库杂交鉴定结果显示,整张芯片荧光信号均匀一致,背景清晰,各基因重复样点杂交结果一致,各质控点能正常显示。成功制备了人mt DNA基因表达谱芯片,完善了该芯片的制备和使用程序,通过初步应用,证明所研制的人mt DNA基因表达谱芯片具有特异性高、稳定性好等优点,可用于不同组织或细胞样本c DNA文库mt DNA基因的差异表达分析。

• 单位
  广东医科大学; 广东省人民医院（广东省医学科学院）; 第三军医大学附属新桥医院