赤羽病病毒N蛋白阻断ELISA抗体检测方法的建立及应用

作者：陈冬杰; 魏方; 王晶晶; 许晓琳; 吴绍强

来源：中国动物传染病学报, 2022, 1-8.

DOI：10.19958/j.cnki.cn31-2031/s.20220708.002

• 赤羽病病毒
• 单克隆抗体
• 阻断ELISA
• 蛋白表达

本研究旨在建立一种赤羽病病毒（AKAV）N蛋白阻断ELISA抗体检测方法。以纯化的AKAV N重组蛋白作为包被抗原，HRP标记的单克隆抗体（McAb）1C5作为阻断抗体，通过对反应条件进行优化，建立了基于AKAV N蛋白的AKAV 阻断ELISA抗体检测方法。用建立的阻断ELISA方法检测67份临床阴性血清，计算血清阻断率PI并确定了临界值及判定标准：当PI＞53.1%时判定为AKAV抗体阳性；PI＜46.8%时判定为AKAV抗体阴性；当PI介于两者之间时，判定为可疑。该方法与牛病毒性腹泻病毒、牛结节性皮肤病病毒和蓝舌病毒的抗体阳性血清无交叉反应。用该方法与商品化ID screen AKAV 抗体检测试剂盒同时检测79份牛临床血清样品，两种方法的符合率为91.1%。本实验室建立的AKAV阻断ELISA抗体检测方法可用于国内临床中AKAV血清抗体的检测，对AKAV的临床诊断具有非常重要的参考意义。

• 单位
  中国检验检疫科学研究院