脂质体包被SARS-CoV-2 N基因的候选DNA疫苗转染人源细胞效率研究

作者：周健; 左原源; 赵雨芊; 赖清润; 郑惠文; 赵鑫; 秦丽; 张兴龙; 施海晶; 刘龙丁; 李恒^*

来源：云南大学学报(自然科学版), 2022, 44(05): 1062-1068.

DOI：10.7540/j.ynu.20210652

• 脂质体
• SARS-CoV-2 N
• DNA疫苗
• 人源细胞293T

利用脂质体包被含有SARS-CoV-2核衣壳蛋白(nucleocapsid protein;N)基因的候选DNA疫苗，并检测其在人源细胞293T中的转染效率.将SARS-COV-2 N基因克隆入真核表达载体pcDNA3.1,DNA测序及转染后的质谱测序证明能够表达正确蛋白.利用脂质体包被pcDNA3.1-SARS-COV-2-N基因，并进行超离纯化、核酸电泳、透射电镜等检测发现形成50～100 nm的脂质体纳米颗粒，定量后将纳米颗粒转染293T细胞，并对比脂质体转染与FUGENE?HD试剂转染效果，表明制备的候选重组脂质体DNA疫苗能够形成稳定的纳米颗粒，并可在人源细胞293T中高效表达.

• 单位
  生命科学学院; 中国医学科学院医学生物学研究所; 云南大学