14型蓝舌病病毒VP7蛋白原核表达及间接ELISA抗体检测方法的建立

作者：孙雯; 张莹辉; 曹雨; 朱真; 杜吉革; ***; 陈小云; 姚文生; 钱莺娟; 印春生^*

来源：中国兽医学报, 2020, 40(01): 42-48.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2020.01.08

• 蓝舌病病毒
• VP7蛋白
• 原核表达
• 间接ELISA

为建立蓝舌病(bluetongue,BT)的血清学诊断方法,本研究通过得到14型蓝舌病病毒(bluetongue virus,BTV)的s7基因,并在大肠杆菌表达系统中进行表达,原核表达得到VP7蛋白,并对表达的包涵体VP7蛋白进行纯化,Western blot分析表明,纯化的VP7蛋白具有良好的抗原性。以纯化的VP7蛋白作为包被抗原,建立间接ELISA检测方法。该方法与羊痘阳性血清,羊口蹄疫阳性血清和羊的小反刍兽疫阳性血清均无交叉反应,与中和试验比较,两者符合率为90%,ELISA批内和批间重复性试验显示,D值的变异系数小于10%。说明本方法具有良好的特异性和重复性。本研究在国内首次建立了14型BTV抗体间接ELISA方法,可用于BTV感染的流行病学调查以及疫苗接种动物的抗体水平监测,为以后相关BTV ELISA检测试剂盒研发提供技术平台。

• 单位
  中国兽医药品监察所