柠檬酸转运蛋白突变基因在L-亮氨酸发酵中的应用

作者：马跃超; 崔毅; 杜丽红; 陈宁^*

来源：中国酿造, 2019, 38(04): 148-154.

• 柠檬酸转运蛋白
• 突变基因
• 柠檬酸
• L-亮氨酸
• 谷氨酸棒杆菌

该研究利用同源重组方法敲除L-亮氨酸生产菌株谷氨酸棒状杆菌(Corynebacterium glutamicum)ALDP的柠檬酸合酶基因glt A,并引入柠檬酸转运蛋白突变基因CP103,获得一株能高效摄取柠檬酸的菌株。在此基础上,比较不同的柠檬酸添加方式对菌株的OD600nm值、L-亮氨酸产量和糖酸转化率的影响。结果表明,通过引入柠檬酸转运蛋白突变基因CP103,显著提高了C. glutamicum ALDPΔglt A的柠檬酸摄取能力。当初始发酵液中的柠檬酸添加量为5 g/L,并在发酵过程中通过流加的方式维持柠檬酸含量在10～15 g/L范围内,较出发菌株C. glutamicum ALDP,C. glutamicum ALDPΔglt ACP103的OD600nm值轻微下降,但是L-亮氨酸产量达到最高,为(22.5±1.5)g/L、糖酸转化率为23.1%,分别提高23.0%和48.1%。

• 单位
  天津科技大学; 生物工程学院