摘要
目的探讨应用于乙肝携带者卵巢颗粒细胞涂片原位杂交技术。方法选择6例乙肝携带者颗粒细胞涂片原位杂交,每例涂片12张,分别进行蛋白酶K浓度(1μg、2μg、3μg)、消化时间(1min、3min、5min)、探针浓度(1∶10、1∶20、1∶30)及显色时间(10min、20min、30min)优化。结果 3例颗粒细胞核均检测到HBVDNA阳性信号。最佳反应条件为,蛋白酶K浓度为2μg,消化时间为3min,探针∶预杂交液比为1∶20,显色时间为20min。结论蛋白酶K浓度、消化时间、探针浓度及显色时间是原位杂交中关键性步骤,该技术可用于颗粒细胞涂片的研究。
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单位北京市第二医院; 北京地坛医院; 北京大学第三医院