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摘要
目的:为生物活性成分含量较高的黄果人参品种建立快速、准确的分子鉴定方法,提高黄果人参的产量及质量稳定性。方法:扩增可能含有种内多态性的人参叶绿体基因片段,通过直接测序比对分析,发掘黄果人参的单核苷酸多态性位点。根据特异性位点设计黄果人参的品种特异性引物,并利用多重及荧光定量PCR对黄果人参与其他人参品种进行区分和鉴定。结果:在ccsA基因的第772个碱基处发现了黄果人参的非同义突变位点(G/A),通过在3′末端引入错配碱基的方式设计了黄果人参的品种特异性引物。在多重PCR体系下只有黄果人参扩增出了217 bp的品种特异性条带,在荧光定量PCR中只有黄果人参有荧光信号产生,等位基因分型分析可实现黄果人参的快速高通量鉴定。结论:研究建立的多重及位点特异性荧光定量PCR体系可以有效实现黄果人参的快速、准确鉴定,为黄果人参的品种鉴定及田间快速筛选提供了一种有效的DNA分子标记技术手段。
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