含H5N1禽流感病毒核酸序列的病毒样颗粒的制备及应用

作者：戚宇华; 崔仑标; 史智扬; 葛以跃; 李显; 张文帅; 单军; 汪华

来源：中国人兽共患病学报, 2010, (01): 29-32+35.

• MS2噬菌体
• 禽流感病毒H5N1
• 病毒样颗粒
• 原核表达

目的构建耐RNase酶的内含禽流感病毒H5N1亚型部分核酸序列的病毒样颗粒。方法构建中间载体pET32a-MS2,将禽流感病毒H5N1亚型的HA、NA和M基因片断连接到中间载体上,构建原核表达载体pET32a-MS2-HA,pET32a-MS2-NA和pET32a-MS2-M,分别转化宿主菌,诱导表达制备病毒样颗粒。结果表达载体经PCR、酶切鉴定和测序分析后证实构建成功。电镜观察到了病毒样颗粒,荧光定量RT-PCR试验表明颗粒稳定性良好。结论成功构建了含禽流感病毒H5N1部分核酸序列的病毒样颗粒且稳定性良好,可作为禽流感H5N1亚型RNA检测的标准品和质控品。