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摘要
为了更加高效低成本地制备茶黄素，以儿茶素作为多酚氧化酶蛋白的交联试剂，对巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)来源的多酚氧化酶进行了酶交联聚集体的制备并应用于茶黄素-3,3’-双没食子酸酯的合成。通过对酶交联参数优化以及交联前后的酶催化性能研究，结果表明，在pH 4.0,EGCG为0.5 mg·mL-1，多酚氧化酶活性200 U·mL-1，交联时间50 min时，可以获得交联酶的最佳酶活回收率。与游离酶相比，交联酶表现出更优异的催化性能(热稳定性、有机溶剂耐受性、底物耐受性)。交联酶被用于合成茶黄素-3,3’-双没食子酸酯时，产物质量浓度可达800μg·mL-1，且交联酶能被重复循环使用至少3个批次，利用该方法制备茶黄素，可以显著降低酶的应用成本，具有潜在工业化应用价值。
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