HucMSC-ex通过Let-7b调控TGF-βR1抑制肝星状细胞胶原合成

作者:蔡梦洁; 钱嘉莉; 陈逸菲; 王岩金; 赵婷; 刘锦文; 沈松; 严永敏*
来源:江苏大学学报(医学版), 2018, 28(06): 478-482.
DOI:10.13312/j.issn.1671-7783.y180107

摘要

目的:探讨人脐带间质干细胞来源的外泌体(human umbilical cord mesenchymal stem cells derived exosome,Huc MSC-ex)对肝星状细胞LX-2胶原合成的影响及作用机制。方法:提取Huc MSC-ex,采用透射电镜分析Huc MSC-ex形态,蛋白质印迹法检测特异性标志蛋白CD9和CD63的表达;建立TGF-βR1诱导的人肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC) LX-2细胞株活化模型,分别加入25,50和100μg/m L Huc MSC-ex共培养,另设对照组(常规培养),qRT-PCR检测4组Col1、Col3、TGF-βR1和Let-7b mRNA表达,免疫印迹法检测对应的蛋白表达; Let-7b过表达转染LX-2细胞株,qRT-PCR和免疫印迹法检测LX-2中TGF-βR1、αSMA蛋白和mRNA表达。结果:Huc MSC-ex是30~100 nm的膜性囊泡,表达外泌体的特异标志CD9和CD63。与对照组相比,Huc MSC-ex处理组中Col1、Col3和TGF-βR1表达明显下调(P均<0. 001),而Let-7b表达明显上调(P均<0. 001); Let-7b过表达显著抑制LX-2细胞中TGF-βR1和α-SMA的表达(P均<0. 05)。结论:Huc MSC-ex转运Let-7b到肝星状细胞,调控肝星状细胞TGF-βR1表达,抑制肝星状LX-2细胞胶原合成。

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