补中益气汤含药血清对树突状细胞VDR甲基化及PI3K-AKT-mTOR通路的影响

作者：文艺; 高天舒^*

来源：中华中医药学刊, 2023, 1-18.

• 补中益气汤
• AIT
• 树突状细胞
• VDR
• PI3K-AKT-mTOR通路

目的 补中益气汤对树突状细胞(Dendriticcells，DCs)免疫耐受机制的体外研究。方法 小鼠树突状细胞株于体外进行培养，分为A空白对照组、B中药组、C维生素D组、D中药+维生素D组、E中药+LY组、F维生素D+LY组、G中药+VitD+LY组。以15%含药血清，10μmol·L-1维生素D、1.5μmol·L-1LY294002(PI3K阻滞剂)分别干预七组细胞，于培养箱中分别培养24h、48h后，BSP检测树突状细胞VDR基因DNA甲基化情况；Elisa检测细胞上清液中维生素D受体(VitaminDreceptor，VDR)、白细胞介素-10(IL-10)的含量；流式细胞术检测细胞共刺激分子CD40、CD80、CD86、主要组织相容性复合物-Ⅱ(majorhistocom-patibilitycomplex，MHC-Ⅱ)的表达水平；WesternBlot、qPCR检测各组细胞PI3K-AKT-mTOR通路mRNA及蛋白情况。结果 1.中药及维生素D干预后，DCs上VDR的表达增多(P＜0.001或P＜0.05)，VDR基因DNA甲基化情况显著降低。2.中药及维生素D能够提高DCs上清液中IL-10含量(P＜0.05或P＜0.001)，阻滞剂作用后，DCs分泌IL-10的功能均降低(P＜0.05或P＜0.001)。3.中药及维生素D能够降低DCs表面因子CD40、CD80、CD86及MHCD-II的表达(P＜0.05或P＜0.001)，阻滞剂作用后，CD40、CD80、CD86及MHCD-II表达均提高(P＜0.001)。4.WesternBlot、qPCR结果显示，中药及维生素D能够升高DCsPI3K-AKT-mTOR通路mRNA和蛋白的表达(P＜0.05或P＜0.001)，抑制剂作用后，PI3K-AKT-mTOR通路mRNA和蛋白水平均下降，其中磷酸化蛋白降低显著(P＜0.001)。5.24h与48h两个时间点并未见明显差异。结论 补中益气汤通过抑制DCs VDR基因DNA甲基化，激活PI3K-AKT-mTOR通路，使其维持免疫耐受状态。

• 单位
  辽宁中医药大学; 辽宁中医药大学附属医院