骨肉瘤细胞中SORBS1的表达和定位

作者：沈涛; 代炜; 李妍; 许晓军; 巴根; 付勤

来源：山东大学学报(医学版), 2012, 50(02): 21-24+29.

DOI：10.6040/j.issn.1671-7554.2012.02.005

• hSORBS1
• 骨肉瘤
• 真核表达载体
• 融合蛋白
• 免疫沉淀 hSORBS1
• Osteosarcoma
• Eukaryotic expression plasmid
• Fusion protein
• Immunoprecipitation

目的构建人SORBS1真核表达载体并检测在骨肉瘤细胞内的表达及定位。方法以GST-hSORBS1为模板,利用PCR扩增hSORBS1基因cDNA全长,并将其克隆至3*Flag标签的真核表达载体中。进一步将构建的重组载体进行酶切和测序鉴定,并转染到骨肉瘤细胞MG-63中,提取蛋白进行Western blot检测。同时利用共聚焦激光显微镜观察3*Flag-hSORBS1在MG-63细胞中的定位,使用免疫沉淀的方法纯化hSORBS1蛋白。结果hSORBS1基因cDNA全长成功构建到真核表达载体3*Flag中,Western blot检测到3*Flag-hSORBS1融合蛋白表达,且在骨肉瘤细胞MG-...

• 单位
  中国医科大学; 中国医科大学附属盛京医院; 中国医科大学附属口腔医院; 基础医学院