线粒体靶向抗氧化肽SS-31对脓毒症急性肾损伤的保护作用

作者：孙敏; 马建伟; 叶继辉; 樊恒; 乐健伟; 朱建华^*

来源：中华危重病急救医学, 2021, 33(12).

• 脓毒症
• 急性肾损伤
• 线粒体靶向抗氧化肽SS-31
• 细胞凋亡

目的探讨线粒体靶向抗氧化肽SS-31对脓毒症急性肾损伤(AKI)小鼠肾脏的保护作用及其机制。方法选择60只成年雄性C57BL/6小鼠, 按随机数字表法分为假手术组(10只)、阳性对照组(10只)、脓毒症模型组(20只)和SS-31肽干预组(20只)。采用盲肠结扎穿孔术(CLP)复制脓毒症AKI模型;假手术组只开腹, 不进行CLP。阳性对照组和SS-31肽干预组于术后30 min腹腔注射SS-31肽注射液(5 mg/kg);假手术组和模型组给予等量生理盐水;4组均连续给药7 d。于术后24 h眼眶采血, 分离血清检测血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)水平;术后7 d处死小鼠, 取肾脏组织行苏木素-伊红(HE)染色, 光镜下观察肾脏组织病理学变化, 透射电镜下观察肾脏组织线粒体超微结构改变, 原位末端缺刻标记试验(TUNEL)检测肾小管上皮细胞凋亡情况, 蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α(PGC-1α)、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、活化的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)的蛋白表达水平。结果与假手术组比较, 脓毒症模型组术后24 h SCr和BUN均明显升高〔SCr(μmol/L):93.12±11.80比32.94±3.37, BUN(mmol/L):41.36±6.48比9.49±3.58, 均P<0.05〕, 肾脏组织AMPK、PGC-1α和活化的caspase-3的蛋白表达水平均明显增加(AMPK/β-actin:0.30±0.02比0.12±0.01, PGC-1α/β-actin:0.38±0.03比0.16±0.02, 活化的caspase-3/β-actin:0.20±0.01比0.11±0.02, 均P<0.05);光镜下可见炎性细胞浸润, 肾小球基底膜暴露, 管腔内可见空泡样透明管型;电镜下可见线粒体损伤, 出现肿胀、嵴消失、内外膜破裂, 凋亡细胞数明显增多〔个:24.00(18.75, 31.00)比2.00(0.72, 3.25), P<0.05〕。与脓毒症模型组比较, SS-31肽干预组血清SCr、BUN水平及肾脏组织AMPK、PGC-1α、活化的caspase-3的蛋白表达量均明显降低〔SCr(μmol/L):71.33±10.14比93.12±11.80, BUN(mmol/L):27.00±5.52比41.36±6.48, AMPK/β-actin:0.23±0.01比0.30±0.02, PGC-1α/β-actin:0.27±0.02比0.38±0.03, 活化的caspase-3/β-actin:0.13±0.01比0.20±0.01, 均P<0.05〕;光镜下可见细胞肿胀减轻, 透明管型减少, 损伤程度较脓毒症模型组减轻;电镜下可见线粒体结构完整, 嵴肿胀减轻, 膜结构相对完整, 凋亡细胞数明显减少〔个:13.00(9.00, 16.50)比24.00(18.75, 31.00), P<0.05〕。结论 SS-31肽对脓毒症AKI诱导的器官功能障碍的保护作用可能与维持线粒体稳态、抑制细胞凋亡有关。

• 单位
  宁波市第一医院