小反刍兽疫病毒双抗原夹心时间分辨荧光免疫测定方法的建立

作者：孙雨; 宋晓晖; 董浩; 赵柏林; 曲萍; 蒋菲; 杨天意; 张晨; 杨林; 王传彬^*

来源：动物医学进展, 2019, 40(04): 1-8.

DOI：10.16437/j.cnki.1007-5038.2019.04.001

• 小反刍兽疫病毒
• N活性蛋白
• NH融合蛋白
• 可溶性表达与纯化
• 时间分辨荧光免疫测定方法

通过优化大肠埃希菌密码子、优化表达条件等方法,在大肠埃希菌表达系统中成功获得了可溶性的N蛋白与NH融合蛋白。进一步基于纯化的可溶性N蛋白与NH融合蛋白建立了小反刍兽疫病毒双抗原夹心时间分辨荧光免疫测定方法。该方法敏感性高,特异性强,能够特异性的检测羊血清中的小反刍兽疫病毒抗体,与其他相关疫病病原无交叉反应;重复性试验组内与组间变异系数均小于10%。对292份临床血清样品进行检测,与法国IDVET竞争ELISA试剂盒比较,阳性样品符合率为92.47%,阴性样品符合率为97.26%,总的符合率为94.86%。该方法与传统的ELISA方法相比,具有敏感性、特异性相当,操作简单、快速,具有较高的推广应用价值。

• 单位
  中国动物疫病预防控制中心