基于毛细管电泳技术的牡丹SRAP-PCR反应体系优化及引物筛选

作者：史倩倩; 王雁; 周琳; 黄国伟

来源：江西农业大学学报, 2012, (01): 158-164.

DOI：10.13836/j.jjau.2012029

• 牡丹
• SRAP
• 毛细管电泳
• 体系优化
• 引物筛选 Paeonia suffruticosa Andr.
• SRAP marker
• capillary electrophoresis
• optimization
• selection of primers

以牡丹叶片DNA为模板,对SRAP-PCR反应程序进行研究,确定适合的反应程序,即94℃预变性5 min;94℃变性1 min,33℃退火1 min,72℃延伸1 min,共5个循环;随后94℃变性1 min,52℃退火1 min,72℃延伸1 min,共35个循环;最后72℃延伸10 min。基于毛细管电泳技术,采用正交设计L18(37)对牡丹SRAP-PCR反应体系的5因素(Taq酶,Mg2+,模板DNA,dNTP,引物)3个水平进行了优化,构建了牡丹SRAP最佳反应体系:模板DNA 50 ng,dNTP 0.25 mmol/L,Mg2+浓度2.5 mmol/L,引物浓度0.4μmol/L...

• 单位
  中国林业科学研究院林业研究所; 林木遗传育种国家重点实验室