结核分枝杆菌esat6-rpfD融合基因的原核表达及产物纯化

作者：何俊杰; 柏银兰; 王丽梅; 张薇; 康健; 徐志凯

来源：生物技术通讯, 2009, 20(04): 479-481.

• 结核分枝杆菌
• esat6-rpfD融合基因
• 原核表达
• 纯化 Mycobacterium tuberculosis
• esat6-rpfD fused gene
• prokaryotic expression
• purification

目的:构建结核分枝杆菌融合基因esat6-rpfD的原核表达载体,表达和纯化ESAT6-RpfD融合蛋白。方法:从结核分枝杆菌H37Rv株基因组中经PCR分别扩增esat6和rpfD基因,克隆入pMD19-T载体,测序后克隆入原核表达载体pProExHTB,酶切重组质粒,转化大肠杆菌DH5α,IPTG诱导表达融合蛋白,亲和层析纯化融合蛋白。结果:PCR扩增的esat6、rpfD基因序列与GenBank报道一致;诱导表达后,经SDS-PAGE和Western blot分析,在相对分子质量约30000处有目的条带,融合蛋白以包涵体形式表达。结论:构建了esat6-rpfD融合基因原核表达载体,并在...

• 单位
  第四军医大学