构建表达IL-10的重组乳酸杆菌

作者：邱志兵; 钟良; 陈佳婕; 戎兰; 陈坚

来源：复旦学报(医学版), 2011, (02): 163-167.

• 干酪乳酸杆菌
• IL-10
• 信号肽
• 重组质粒
• 目的蛋白 Lactobacillu casei
• IL-10
• singnal peptide
• recombined plasmid
• objective protein

目的构建表达IL-10的重组乳酸杆菌。方法人工合成信号肽系列后与IL-10基因连接后克隆到干酪乳酸杆菌(Lactobacillus casei,L.casei)整合型表达载体pIlac的lac启动子下游,得到重组质粒pIlac-sp-IL10,电穿孔转化L.caseiCECT 5276。挑选转化后的耐药菌落在含红霉素的培养基中培养,抽提染色体DNA,PCR及测序鉴定证实IL-10基因是否整合到L.casei的基因组中,Western blot检测重组蛋白表达。结果 IL-10基因整合到干酪乳酸杆菌的基因组中;重组L.casei产生的目的蛋白部分分泌进入培养上清。结论 IL-10在L.caseiCECT 5276中得到了分泌表达。

• 单位
  复旦大学附属华山医院