日本血吸虫重组两歧双歧杆菌(pGEX-Sj32)疫苗构建及鉴定

作者：谭建蓉; 李文桂; 张丽

来源：中华地方病学杂志, 2015, 34(01): 37-40.

DOI：10.3760/cma.j.issn.2095-4255.2015.01.010

• 血吸虫,日本
• 重组,遗传
• 两歧双歧杆菌
• 疫苗

目的构建和鉴定日本血吸虫重组两歧双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum,Bb)pGEX-Sj32疫苗。方法从重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所构建的重组大肠埃希菌BL21(pET28α-Sj32)中抽提质粒pET28α-Sj32,通过PCR扩增Sj32抗原编码基因;将Sj32基因定向克隆至大肠埃希菌-双歧杆菌穿梭表达载体pGEX-1λT中,构建重组质粒pGEX-Sj32,将该重组质粒转化至大肠埃希菌BL21感受态细胞(DE3),抽提质粒后进行双酶切鉴定;采用电穿孔法,将重组质粒pGEX-Sj32转化至Bb,构建Bb(pGEX-Sj32)疫苗,再从该疫苗中抽提重组质粒pGEX-Sj32,以其为模板进行PCR鉴定。结果从抽提质粒pET28α-Sj32中PCR扩增出长度约为1 270 bp的Sj32基因片段;重组质粒pGEX-Sj32经双酶切鉴定,获得长度为4 947 bp的载体片段和长度为1 270 bp的Sj32基因片段;以抽提的疫苗质粒pGEX-Sj32为模板进行PCR扩增,得到了长度约为1 270 bp的Sj32基因片段,与预期结果相符。结论成功构建了日本血吸虫重组Bb(pGEX-Sj32)疫苗。

• 单位
  重庆医科大学附属第一医院