显微三维成像技术分析替罗非班抑制血小板黏附聚集的量效关系

作者：何菲; 张天聪; 陈丹; 丁玲; 邓素容; 米永华; 刘占术; 李远^*

来源：Chinese Journal of Analytical Chemistry, 2022, 50(02): 244-255.

DOI：10.19756/j.issn.0253-3820.210671

• 血小板聚集
• 显微三维形态
• 胶原纤维
• 玻璃
• 替罗非班
• 量效关系

建立了一种显微三维成像技术用于定性和定量评价替罗非班(血小板膜糖蛋白(GP)Ⅱb/Ⅲa受体拮抗剂)抑制血小板黏附聚集的量效关系。在健康志愿者富血小板血浆(PRP)中加入0～50μg/mL替罗非班进行处理,将处理后的PRP分别滴加在胶原纤维蛋白和玻璃表面上,诱导血小板活化聚集,通过激光显微三维成像技术观察不同条件下血小板聚集体的显微三维形态学图像,并量化血小板聚集体的体积、面积覆盖率、血小板黏附数量和活化血小板数量比例。结果表明,利用激光显微三维成像技术可直观地观察到胶原纤维蛋白和玻璃表面形成的血小板聚集体的三维显微形态。胶原纤维蛋白表面形成的血小板聚集体呈薄片状,玻璃表面形成的血小板聚集体呈山丘状。对于胶原纤维蛋白表面,替罗非班终浓度为1.56～12.5μg/mL时,随其浓度增加,血小板聚集体体积和面积覆盖率显著降低;当替罗非班浓度增加至25和50μg/mL,仅见血小板在胶原纤维蛋白上发生黏附,血小板黏附数量和活化血小板比例随浓度增加而显著降低。在玻璃表面,经1.56μg/mL替罗非班处理,血小板聚集体体积和面积覆盖率降低;3.15～50μg/mL替罗非班可完全抑制血小板聚集,并且血小板黏附数量和活化血小板比例随替罗非班浓度增加而显著降低。综上,3.15～12.5μg/mL替罗非班既可完全抑制血小板在玻璃表面的聚集,又保留了部分血小板在胶原纤维蛋白表面上的聚集能力。采用显微三维成像技术定性和定量分析替罗非班抑制血小板在胶原纤维蛋白和玻璃表面的黏附聚集的量效关系,可为临床合理选择替罗非班的剂量提供新的分析方法。

• 单位
  重庆医科大学附属永川医院; 重庆市血液中心; 中心实验室