细粒棘球蚴原头节分泌的细胞外囊泡中人源蛋白质组学分析

作者：史春丽; 杨慧; 潘雯; 张馨; 朱晓庭; 赵嘉庆^*

来源：中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2020, 38(06): 695-701.

• 细粒棘球蚴
• 原头节
• 细胞外囊泡
• 免疫逃逸
• 蛋白质组学

目的蛋白质组学分析鉴定来源于细粒棘球蚴原头节分泌的细胞外囊泡(EVs)中人源蛋白质的组分。方法收集细粒棘球蚴病患者肝脏中的完整包囊,无菌条件下分离原头节,用含30%去外泌体的胎牛血清完全培养基体外培养原头节,每3天换1次培养基并收集培养上清,用EVs分离试剂盒分离培养上清中的EVs。透射电镜观察EVs的形态;纳米粒子跟踪分析EVs的粒径;采用液相色谱-质谱法对EVs进行蛋白质组学测序,二级质谱数据使用Maxquant (v1.5.2.8)进行蛋白检索与注释。将人源蛋白通过在线工具David进行组织、疾病及通路的富集比对与注释。结果体外培养原头节分泌的EVs为杯状双层膜性囊泡,直径小于200 nm。蛋白质组学测序共测出20 317条肽段,鉴定获得1 461个蛋白,其中328个为人源蛋白。原头节分泌的EVs中高度富集的外泌体标志蛋白有细丝蛋白、 14-3-3蛋白、热休克蛋白90、热休克蛋白70和丙酮酸激酶。EVs的人源蛋白中,组织富集程度居前3位的为血浆、 Cajal-Retzius细胞、肝脏。疾病富集中涉及感染、免疫和癌症等相关疾病。Bio Carta通路富集结果显示,富集程度居前3位的分别为替代补体通路、凝集素补体通路和补体通路;KEGG通路富集程度居前3位的为黏着斑黏附信号通路、细胞外基质受体相互作用通路和蛋白酶体相互作用通路。结论体外培养原头节分泌的EVs中的人源蛋白与人体血浆和肝脏等组织相关,提示原头节通过分泌EVs与人体进行物质交换。

• 单位
  基础医学院; 宁夏医科大学