摘要
[目的]本文旨在通过构建分离群体定位并克隆水稻雌、雄不育基因OsFMA2,并对其在水稻育性调控中的功能进行探究。[方法]本研究通过EMS诱变水稻宁粳4号得到稳定的不育突变体,对突变体进行表型及细胞学观察,利用精细定位和Mut-map相结合的方法克隆了水稻雌雄不育基因OsFMA2,通过实时荧光定量PCR检测其各组织表达水平差异,利用水稻原生质体表达系统进行OsFMA2蛋白的亚细胞定位。[结果]细胞学观察发现突变体表现为雌雄不育,利用极端个体将其精细定位于水稻第六号染色体长臂448-kb的区间内。结合全基因组重测序结果,最终确定区间内基因OsFMA2为目标基因,该基因编码一个复制蛋白,在单子叶植物中高度保守。基因OsFMA2具有组织特异性,在幼穗中高表达。亚细胞定位结果显示OsFMA2蛋白定位于细胞核中。[结论]基因OsFMA2在幼穗中高表达,可能参与了水稻雄配子减数第一次分裂前期同源重组过程,同时基因OsFMA2的表达对雌配子发育也产生了不利影响。
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单位南京农业大学; 中国农业科学院作物科学研究所; 作物遗传与种质创新国家重点实验室