“风寒湿致痹”理论指导下体内外骨关节炎模型建立与评价研究

作者：沈雪; 薛艳; 陈龑; 李名; 张琥; 曹月龙

来源：中国中医基础医学杂志, 2021, 27(11): 1721-1724.

DOI：10.19945/j.cnki.issn.1006-3250.2021.11.010

• 膝骨关节炎
• 风
• 寒
• 湿
• 软骨退变

目的:建立风寒湿型骨关节炎大鼠体内外模型,为"风寒湿致痹"这一中医病因病机理论提供实验基础。方法:动物模型的建立与评价方面,将SD大鼠随机分为空白组(Blank组)、膝骨关节炎组(KOA组)、风寒湿+膝骨关节炎组(FKOA组),采用改良Hulth法和人工气候箱模拟风寒湿环境构建风寒湿型膝骨关节炎动物模型,将FKOA组血清同时备用于体外研究,通过HE染色观察大鼠膝关节病理形态,ELISA法检测大鼠血清中白细胞介素(interleukin, IL)-1β、IL-6的含量。体外模型的建立与评价方面,通过分离、提取并培养原代软骨细胞,分为膝骨关节炎对照组(Control组,以IL-1β进行诱导)和风寒湿组(FHS组,以IL-1β进行诱导及FKOA组大鼠模型的血清干预)。显微镜下观察软骨细胞形态,通过基因测序对比与骨关节炎发生发展相关的一些基因的表达情况,并着重检测Ⅱ型胶原蛋白α1(collagen type II alpha 1,Col2a1)、蛋白多糖(aggrecan, Acan)、SRY相关高迁移率族盒蛋白转录因子9(SRY-related HMG box transcription factor 9,Sox9)mRNA表达的水平。结果:体内实验发现,与Blank相比较,其余2组的大鼠膝关节软骨细胞明显具有肥大化和成簇化表现,且FKOA组大鼠血清中IL-1β、IL-6含量较KOA组显著升高(P<0.05);体外实验中,相较Control组软骨细胞,加入风寒湿血清的软骨细胞形态学明显发生改变,多为扁平长梭形或不规则形,基因测序结果显示,与Control组比较,FHS组Col2a1、Acan、Sox9 mRNA的表达明显下降(P<0.01)。结论:风寒湿因素处理后的膝骨关节炎大鼠加重了膝骨关节炎的病症特点,值得进一步研究与发掘。

• 单位
  上海中医药大学附属曙光医院