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摘要
为研究马属动物SAMHD1的抗病毒活性,本研究构建了稳定表达马SAMHD1（eqSAMHD1）、驴SAMHD1（doSAMHD1）的U937细胞系。利用pLPCX慢病毒表达载体构建重组质粒pLPCX-doSAMHD1-HA和pLPCX-eqSAMHD1-HA。将重组质粒和假病毒包装重组质粒（pCgp和pVSV-G）共转染于293T细胞中,制备表达SAMHD1的假病毒,将其感染人急性单核细胞白血病细胞系U937,利用嘌呤霉素筛选,建立了稳定表达doSAMHD1和eqSAMHD1的U937细胞系。经western blot鉴定,该细胞系能够稳定表达doSAMHD1和eqSAMHD1蛋白。将人类免疫缺陷病毒（HIV）和马传染性贫血病毒（EIAV）的假病毒感染该细胞系,结果显示表达eqSAMHD1和doSAMHD1的细胞系均能够显著抑制HIV假病毒复制,限制倍数分别为1719倍和1418倍;两种细胞系也能够抑制EIAV假病毒复制,限制倍数分别为34倍和23倍。该细胞系的建立为进一步评价和研究马属动物SAMHD1的抗病毒机制奠定了基础。
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单位兽医生物技术国家重点实验室; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
