脱氧胞苷激酶调控电离辐射诱导三阴性乳腺癌细胞铁死亡

作者：魏刚; 杨永净; 刘博宇; 朱宣辑^*; 钟睿^*

来源：中华放射肿瘤学杂志, 2023, 32(12).

• 辐射, 电离
• 脱氧胞苷激酶
• 铁死亡
• 三阴性乳腺癌
• 磷酸化

目的探索脱氧胞苷激酶(dCK)在放射诱导三阴性乳腺癌(TNBC)铁死亡中的调控作用。方法用人乳腺癌细胞株MDA-MB-231构建dCK基因沉默和不同磷酸化表型的细胞模型, 并给予铁死亡诱导剂Erastin和/或铁死亡抑制剂Fer-1联合或不联合X线放射处理。通过MTT法检测细胞活性, 活性氧荧光探针(DCFH-DA)检测活性氧水平, 通过蛋白质印迹法(Western blot)检测dCK、转铁蛋白、转铁蛋白受体(TfR1)、铁转运蛋白(FPN)、铁蛋白重链1(FTH1)的蛋白表达量。采用SPSS 17.0和Origin 2021软件对数据进行分析。计量资料符合正态分布, 以xˉ±s表示。两组之间的比较使用Studentt检验进行, 而三组及以上的比较使用单向方差分析。结果在MDA-MB-231细胞中, 放射诱导细胞死亡, 铁死亡诱导剂Erastin显著促进放射诱导的细胞死亡, 铁死亡抑制剂Fer-1能够逆转放射诱导的细胞死亡。与对照细胞相比, dCK基因沉默细胞的放射诱导的细胞死亡增加, 活性氧水平降低, Erastin联合放射诱导的细胞死亡减少, 活性氧水平减弱, Fer-1可使放射诱导的细胞死亡程度降低, 并且Fer-1无法抑制放射对活性氧的诱导作用。与对照细胞相比, 在野生型dCK(dCK-WT)或dCK过磷酸化(dCK-S74E)的dCK基因沉默细胞中, 放射诱导细胞死亡减少, 活性氧水平降低, FTH1表达量降低, 加入放射进一步降低FTH1的表达水平。此外, 在这些细胞中, Erastin促进放射诱导的细胞死亡和活性氧水平增加, Fer-1对放射诱导活性氧和细胞死亡的逆转程度明显增强。结论 dCK磷酸化促进了放射诱导TNBC细胞的铁死亡, 靶向dCK可能是一种克服TNBC治疗中辐射抗性的新治疗方式。

• 单位
  吉林大学; 吉林省肿瘤医院