摘要

目的:观察脾虚证大鼠模型腓肠肌损伤情况并对其机制进行研究。方法将大鼠随机分为对照组和模型组,模型组采用饮食失节联合游泳劳倦法复制脾虚证模型,对照组予以正常饲养。定期观察并记录2组大鼠的外观表征、体质量、饮食量和粪便含水率。实验第2、3、4周末测定各组大鼠的游泳力竭时间、抓握力、尿D-木糖排泄率、脾脏指数、胸腺指数及腓肠肌湿质量,HE染色观察腓肠肌病理结构,ELISA法检测血清胃动素、胃泌素、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和腓肠肌柠檬酸合酶、Ca2+-ATP酶、IL-1β、IL-6、TNF-α。实验第4周末用免疫组织化学法检测腓肠肌IL-1β、IL-6、TNF-α阳性表达水平,免疫荧光法检测腓肠肌剪切后半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cleaved-caspase3)阳性细胞。结果与对照组相比,第2~4周模型组大鼠体质量、饮食量、粪便含水率、游泳力竭时间、抓握力、腓肠肌湿质量和尿D-木糖排泄率下降(P<0.01);第3~4周模型组大鼠血清胃泌素下降(P<0.05,P<0.01);第2周模型组大鼠腓肠肌湿质量/体质量和血清IL-6增加(P<0.05,P<0.01);第4周模型组大鼠腓肠肌湿质量/体质量、脾脏指数、胸腺指数、腓肠肌柠檬酸合酶和Ca2+-ATPase水平、血清胃泌素、IL-1β和TNF-α含量下降(P<0.01),腓肠肌cleaved-caspase3、IL-1β、IL-6、TNF-α含量增加(P<0.01)。结论饮食失节联合游泳劳倦法复制的脾虚证模型大鼠具有中医脾虚证的外观表征和实验室相关指标的变化特点,腓肠肌出现肌力减退和肌萎缩,并随造模时间延长而加重,伴有全身免疫功能减退与血清、腓肠肌炎性因子含量增加,提示脾虚证骨骼肌受损与炎性损伤机制有关。