睾酮人工抗原的合成及酶联免疫方法的建立

作者：高璐; 孙嘉笛; 王利平; 纪剑^*; 孙秀兰^*

来源：生物加工过程, 2020, 18(04): 452-456.

• 睾酮
• 人工抗原
• 紫外吸收
• 酶联免疫方法
• 检测
• 肉制品
• 食品安全

为检测食品中睾酮的残留,合成睾酮人工抗原并建立一种用于检测睾酮的酶联免疫方法(ELISA)。通过混合酸酐法将肟化的睾酮与鸡卵清蛋白偶联,合成人工包被抗原,与睾酮单克隆抗体竞争结合,根据光密度(OD)值对睾酮定量。结果表明,经紫外吸收、红外光谱、SDS-PAGE电泳验证人工抗原合成成功,建立的间接竞争酶联免疫标准曲线线性范围为1～25μg/L,最低检测限为0.261 7μg/L。对该检测方法进行稳定性测定,将储存3、7、10、14 d的试剂盒进行标准品测定,所得批间差异均小于5%。同时进行样品加标回收试验,平均加标回收率在87.51%～102.83%,说明建立的睾酮ELISA检测具有很高的准确度,可以应用于实际样品中睾酮的检测。本研究为进一步开发睾酮酶联免疫检测试剂盒检测食品中睾酮残留奠定基础,为保障我国肉制品质量安全提供一种有效的技术手段。

• 单位
  江南大学