杜仲苷对骨关节炎软骨细胞增殖和凋亡的影响及其分子机制

作者：任虹; 刘娟; 于桂泳^*; 李美

来源：医学研究生学报, 2021, 34(11): 1144-1149.

DOI：10.16571/j.cnki.1008-8199.2021.11.005

• 杜仲苷
• 骨关节炎
• Prdx5
• 增殖
• 凋亡

目的 杜仲苷影响软骨细胞增殖和凋亡的分子机制尚未完全清楚。文中旨在研究杜仲苷对骨关节炎软骨细胞增殖、凋亡的影响及分子机制。方法 取对数生长期软骨细胞,分别用终浓度为10、100、500、1000μmol/L的杜仲苷处理,分别为杜仲苷10μmol/L组、杜仲苷100μmol/L组、杜仲苷500μmol/L组、杜仲苷1000μmol/L组,对照组为正常培养的细胞。检测不同浓度杜仲苷对骨关节炎软骨细胞增殖的影响,并选出最佳杜仲苷浓度作后续实验,为杜仲苷组。取对数生长期软骨细胞,无血清重悬后进行转染,分为pcDNA组(转染pcDNA)、pcDNA-Prdx5组(转染pcDNA-Prdx5 mimics)、杜仲苷+si-NC组(转染si-NC后用500μmol/L杜仲苷处理)、杜仲苷+si-Prdx5组(转染si-Prdx5后用500μmol/L杜仲苷处理)。qRT-PCR检测骨关节炎软骨细胞中Prdx5 mRNA的表达水平; Western blot检测Prdx5蛋白表达; CCK-8法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡。结果 与对照组比较,随着杜仲苷浓度的升高,骨关节炎软骨细胞的活性逐渐升高(P<0.05),选用500μmol/L杜仲苷作后续实验。流式细胞仪检测结果显示,杜仲苷组骨关节炎软骨细胞的凋亡率[(7.89±1.03)%]较对照组[(18.76±1.24)%]显著降低(P<0.05)。qRT-PCR和Western blot检测结果显示,与对照组比较,杜仲苷组Bcl-2、Prdx5的mRNA和蛋白表达水平显著升高,Bax mRNA和蛋白的表达水平显著降低(P<0.05)。pcDNA-Prdx5组Prdx5蛋白的表达水平、骨关节炎软骨细胞的活性显著高于pcDNA组(P<0.05),骨关节炎软骨细胞的凋亡率显著低于pcDNA组(P<0.05)。与杜仲苷+si-NC组Prdx5蛋白的表达水平比较,杜仲苷+si-Prdx5组显著降低(P<0.05)。CCK-8法检测结果显示,与对照组骨关节炎软骨细胞的活性比较,杜仲苷组显著升高(P<0.05);与杜仲苷+si-NC组骨关节炎软骨细胞的活性比较,杜仲苷+si-Prdx5组显著降低(P<0.05)。流式细胞仪检测结果显示,与对照组骨关节炎软骨细胞的凋亡率比较,杜仲苷组显著降低(P<0.05);与杜仲苷+si-NC组骨关节炎软骨细胞的凋亡率比较,杜仲苷+si-Prdx5组显著升高(P<0.05)。结论 杜仲苷可能通过上调Prdx5促进骨关节炎软骨细胞增殖,抑制其凋亡。

• 单位
  衡水市人民医院