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摘要
非天然辅因子可在复杂生物代谢网络中选择性调控氧化还原反应、研究辅因子在胞内调控方式。非天然辅因子用于细胞催化和代谢研究,需要解决其跨细胞膜转运问题。通过筛选发现转运蛋白Ndt可高效转运非天然辅因子烟酰胺胞嘧啶二核苷酸(NCD),当胞外添加0.1 mM NCD,Ndt通过主动运输可使胞内NCD达到1.4mM。利用Ndt的转运功能,在胞内成功构建了基于NCD的人工氧化还原体系,并研究了辅因子胞内稳定性。通过定向进化有望进一步提高Ndt转运效率,并用于其他非天然辅因子的转运。
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非天然辅因子可在复杂生物代谢网络中选择性调控氧化还原反应、研究辅因子在胞内调控方式。非天然辅因子用于细胞催化和代谢研究,需要解决其跨细胞膜转运问题。通过筛选发现转运蛋白Ndt可高效转运非天然辅因子烟酰胺胞嘧啶二核苷酸(NCD),当胞外添加0.1 mM NCD,Ndt通过主动运输可使胞内NCD达到1.4mM。利用Ndt的转运功能,在胞内成功构建了基于NCD的人工氧化还原体系,并研究了辅因子胞内稳定性。通过定向进化有望进一步提高Ndt转运效率,并用于其他非天然辅因子的转运。
