微小RNA-27a在子宫颈癌中的表达变化及作用机制

作者：仉红平; 李峰^*; 牛占杰

来源：解剖学报, 2021, 52(01): 78-83.

DOI：10.16098/j.issn.0529-1356.2021.01.012

• 微小RNA-27a
• 子宫颈癌
• F框/WD-40域蛋白7
• 实时定量聚合酶链反应
• 流式细胞术
• 免疫印迹法
• 人

目的探讨微小RNA(miR)-27a靶向调控F框/WD-40域蛋白7(FBXW7)对子宫颈癌细胞的增殖、凋亡及侵袭的影响。方法 30例宫颈癌组织和癌旁组织、30例正常宫颈组织新鲜标本用于实验。Real-time PCR检测宫颈癌、癌旁组织、正常宫颈组织以及宫颈癌细胞(SiHa、Caski、He La、HCC94)、子宫颈鳞状上皮永生化细胞H8中miR-27a的表达。应用脂质体转染法将miR-27a抑制剂(inhibitor)及其阴性对照转染至SiHa细胞,CCK-8法、流式细胞术、Transwell法分别检测miR-27a对SiHa细胞增殖活性、细胞周期、凋亡率和侵袭能力的影响。生物学信息法预测miR-27a的靶向基因,双荧光素酶报告基因实验结合Western bloting验证miR-27a对FBXW7的靶向调控作用。结果与癌旁组织和正常宫颈组织相比,宫颈癌组织中miR-27a高表达(P<0.05);与子宫颈鳞状上皮永生化细胞H8相比,宫颈癌细胞SiHa、Caski、He La、HCC94中miR-27a高表达(P<0.05)。抑制SiHa细胞中miR-27a的表达,能够明显降低细胞的增殖活性(P<0.05),提高G0/G1期细胞比例(P<0.05),降低S期和G2/M期细胞比例(P<0.05),提高细胞凋亡率(P<0.05),抑制细胞的侵袭能力(P<0.05)。生物学信息法预测FBXW7可能是miR-27a的靶向调控基因;双荧光素酶报告基因实验显示,miR-27a可以与FBXW7基因的3’UTR区特异性结合(P<0.05),并负调控FBXW7蛋白的表达(P<0.05)。结论 MiR-27a在宫颈癌的发生发展中起着癌基因的作用,抑制miR-27a表达能够明显抑制宫颈癌细胞的恶性生物学行为,其机制可能与靶向调控FBXW7的表达有关。

• 单位
  聊城市人民医院