HMCES蛋白促进猪流行性腹泻病毒在Vero细胞中的复制

作者：温永强; 于瑞明; 张莉萍; 张中旺; 王永录; 潘丽; 刘霞; 刘新生

来源：微生物学报, 2022, 62(08): 3152-3165.

DOI：10.13343/j.cnki.wsxb.20210767

• HMCES
• 猪流行性腹泻病毒
• 病毒复制
• Vero细胞

【目的】鉴定能够调控猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)复制的关键宿主蛋白。【方法】利用LC-MS/MS技术结合串联质谱标签(tandem mass tag,TMT)，分析PEDV感染Vero细胞36 h后和未感染组的蛋白组学差异。鉴定筛选了114个显著差异表达蛋白，其中宿主胚胎干细胞特异性5-羟甲基胞嘧啶结合蛋白(5-hydroxymethylcytosine binding,ES cell-specific protein,HMCES)显著上调。进一步构建HMCES真核表达质粒，通过蛋白免疫印迹和实时荧光定量PCR检测过表达HMCES对PEDV复制的影响；合成针对HMCES基因的特异性si RNA，利用Western blotting和RT-q PCR检测si RNA对HMCES表达的干扰效果及HMCES被干扰后对PEDV复制的影响。【结果】过表达HMCES能显著促进PEDV在Vero细胞中复制，并且复制水平随着HMCES的剂量递增呈现剂量依赖式增加；si RNA-341下调内源性HMCES表达进而抑制PEDV复制。【结论】HMCES促进PEDV复制，本研究为进一步探究HMCES在抗PEDV免疫应答中的作用及机制提供了参考依据。

• 单位
  甘肃农业大学; 中国农业科学院兰州兽医研究所; 生命科学技术学院