miR-119a靶向作用FHIT对膀胱肿瘤细胞生物学行为的影响

作者：何鹏; 郭伟

来源：广东医学, 2019, 40(15): 2143-2148.

DOI：10.13820/j.cnki.gdyx.20190261

• 膀胱癌
• miR-119a
• FHIT
• 增殖
• 迁移

目的探讨miR-119a靶向作用FHIT对膀胱肿瘤细胞生物学行为的影响。进一步明确膀胱癌发生、发展过程中的分子作用机制,以及寻找膀胱癌生物治疗新作用靶点提供理论依据。方法将miR-119a作为研究的目的基因,采用TargetScan靶基因预测软件,预测miR-119a可能靶向调控FHIT基因。选取125例膀胱癌患者的膀胱癌组织及癌旁正常组织,实时定量PCR(Real-time PCR)用于检验膀胱癌组织及癌旁正常组织miR-119a及FHIT的表达量并进行对比。设计合成并构建miR-119a慢病毒表达载体,并成功转染至人膀胱癌T24和5637细胞中。然后基于目前常用的体外实验方法,如CCK-8、周期、平板克隆、Transwell及细胞划痕实验等实验,对比分析实验组(即上调miR-119a组)和对照组(即未上调miR-119a组)在细胞增殖、迁移、侵袭等过程的差异性。结果膀胱癌组织中的miR-119a表达量(11.330±0.106)明显比正常组织中(0.365±0.076)的高,差异有统计学意义(P<0.05);但FHIT的表达量较低(0.596±0.125 vs 1.203±0.212)。上调miR-119a组中5637细胞和T24细胞的miR-119a表达量均有所增加,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);CCK-8实验及平板克隆实验与对照组相比,上调组的细胞吸光度(OD)值及细胞集落数量明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。细胞周期实验,上调miR-119a后停留在分裂期的膀胱肿瘤细胞明显增加(T24:64.325±5.214 vs 55.315±4.215)(5637:53.103±3.124 vs 46.324±4.452),差异有统计学意义(P<0.05);Transwell实验及细胞划痕实验,与对组照组相比,上调膀胱肿瘤细胞穿膜细胞的数量及爬行速率升高明显,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 miR-119a在膀胱癌组织中表达量显著上升,上调miR-119a可能与靶向抑制FHIT的表达来促进膀胱肿瘤细胞增值与迁移效应有关。

• 单位
  武汉市第五医院