草鱼BAC文库中TLR3基因的筛选及表达特征的研究

作者：杨春荣; 苏建国; 张荣芳; 董捷; 汪亚平; 张成勋

来源：西北农林科技大学学报(自然科学版), 2010, (06): 83-87.

DOI：10.13207/j.cnki.jnwafu.2010.06.037

• 草鱼
• BAC文库
• TLR3基因
• 基因表达 Grass carp(Ctenopharyngodon idella)
• BAC library
• TLR3 gene
• gene expression

【目的】从草鱼的BAC文库中筛选TLR3基因的阳性克隆,研究该基因在草鱼体内的表达规律,为进一步研究奠定基础。【方法】用同位素P32标记的探针,对53 216个BAC克隆以双份平行形式制备的DNA尼龙膜进行杂交筛选,用半定量方法检测TLR3在草鱼不同组织(鳃、心脏、肠、肝胰脏、肌肉、皮肤、脾脏、头肾和中肾)中的表达模式,用实时荧光定量RT-PCR研究草鱼感染呼肠孤病毒后不同时间TLR3的表达规律。【结果】获得了2个TLR3基因的阳性BAC克隆,该基因在被检测的9个组织中都有表达,其中在脾脏、皮肤中的表达量较高。在感染呼肠孤病毒后24 h,草鱼肝胰脏中TLR3的相对表达量显著升高(P<0.05)...

• 单位
  西北农林科技大学; 中国科学院水生生物研究所; 淡水生态与生物技术国家重点实验室